Определение биологической активности стирилових производных четвертинных солей хинолинию


ВСТУПЛЕНИЕ

Химические соединения могут крыться нужны для микроорганизмов и использоваться в качестве питательные вещества либо “неблагоприятными антимикробными (бактерицидными), которые подавляют либо убивают микроорганизмы. Антимикробные вещества пропорционально своей химической структуре могут крыться отнесены заблаговременно нескольких групп. В практике используются разнообразные химические и биологические ядовитые вещества для уничтожения микроорганизмов быть инфекции. При этом используют в качестве неорганические беспричинно и органические соединения. Степень ядовитости этих веществ зависит путем их концентрации, путем вида микроорганизмов. Слабые растворы усиливают жизнедеятельность микробов. Более сильные растворы убивают микроорганизмы один в вегетативной стаде, очень концентрированные уничтожают и споры. Чувствительность разных микробов к одному и тому же химическому соединению неодинакова. Некоторые вещества вредно влияют для одни группы микроорганизмов и являются безвредными для других.

Из неорганических веществ найотрутнишими для микроорганизмов есть соли тяжелых металлов (Hg, Cu, Ag). Бактерицидное действие составляют Сl2, i2, H2o2, Кмnо4. Из минеральных кислот этими свойствами владеют Н2so3, H2b все др.

Сильными ядами для микробов является С6н5он (карболовая кислота) Бы креозол, формалин. В разной степени токсичные спирты и некоторые орг. Кислоты (салициловая, масляная, уксусная, бензойная).

Salmonella, Shigella – факультативно анаэробные; категория 8 грамм – негативные факультативно анаэробные палочки.

Все виды, которые принадлежат к этой систематической группе. Характеризуются продуктами осуществляемого ими брожения; в анаэробных условиях необходимую для роста энергию, они получают с путем процессов волнение и выделяют быть этом линия органических кислот.

Salmonella I Shigella находятся в кишечнике (enteron), потому всю группу называют Enterobacterical.

Salmonella typlhimurium – найрозповсюджениша из бактерий, которая вызывает гастроэнтерит, либо беспричинно называемую, пищевую токсикоинфекцию”, в основе симптомов лежит гнев слизистой шлунково-кишечного тракта выделенными ли полисахаридними токсинами бактерии. В кровяное русло возбудитель не проникает.

Shigella dysenteriae – возбудитель дизентерии.

Литературный обзор

Противомикробная и противогрибковая активность солей 3,4 диметилхинолину и их производных

Высокая антимикробная, активность стирилхинолиниевих солей широко известная. Да, категория японских ученых синтезировала йодметилот 2,4 – диметилбензо [д] хинолиний активный напротив лимфоидной лейкемии мышей и напротив акцизной гематомы крыс. М.С. Козлов с сотрудниками выучил антиферментные свойства безно(f) хинолину.

Антигельминтни свойства 1-метил – 2 –(N – диалкиламинофенид) хинолиниевих солей были исследованы группой американских ученых. Н.С. Козлов с сотрудниками указывают для высокую акты вирусную активность производных бензо (f) хинолину. Работники Иркутского института органической химии досказали активность 8-винилоксихинолину пропорционально отношению к кокковым кислотостойким бактериям и патогенным грибам. Шинкаренко с.В., и Пилюгин г.Т. указывают для биологические свойства озометинив нинальдинию, особенно отмечается дезинфекционная активность синтезированных соединений.

Опанасенко е.П., Пал., Присяжнюк п.В., исследовали антимикробную активность хиностирилив. Указывается для высокую активность синтезированных соединений пропорционально отношению к стафилококку, вакцинному штамму сибирской язвы и антракоиду.

Широкие исследования провели ученые Черновицкого университета пропорционально исследованию антимикробных свойств подидних хинальдину и барбитуровой кислоты. Полученные соединения изучались пропорционально отношению к золотистому стафилококку, кишченой алички, дрижджеподибних грибов рода Кандида. Данные соединения проявляют низшую активность, чем производные 3,4 – диметил-хинолиню.

В работе исследована активность хиногликозидив. Сравнительный единожды показывает, сколько золотистый стафилококк больше чувствителен к хиногликозидив, чем к производной 3,4 –диметилхинолинию; и один Дзюбака были проведены опыты антимикробной активности производных липидину, синтезированных в Ивано-Франковском институте нефти и газа.

До этого биологическая активность липидину и некоторых его производных широко исследована проф.. Б.М. Гуцул яком и сотрудниками.

Поэтому, интересовало более детальное изучение зависимости между строением и активностью новых синтезированных соединений. Не изученными в этом отношении оставались стирилхинолиниеви соли, которые содержат в положении 3, – хинолинового ядра метильну группу.

Противомикробная активность, полученных соединений изучалась общепринятым методом серийных разведений исследуемого претароату. В качестве тестовых микробов использовали staphiloccocus aureus (золотистый стафилококк), Escherichia colи (кишечна палочка), Pseudomas aeruqinosa (синегнойна палочка), Bacillus subtilis (сенная палочка), Candida albicvans (дрижджеподибни грибы рода Кандида).

Противомикробная активность перехлоратив 4- (n – диместиламиностирил) – 3 –метилхинолинию

Физиологичная активность стирилхинолиниевих солей широко известна. Они владеют противомикробной, антигельминтной, противоопухолевой и росторегулюючею активностью. Поэтому интересует изучение зависимости между строением и противомикробной активностью не исследованных в этом плане стирилхинолиниевих солей, которые содержите в положении из хинолинового ядра метильну группу.

Был разработан общественный метод синтеза четвертинных солей 3-метиллипидинию, которые содержат в гетеро атоме азота алкильные. Бензольни либо арильни группировка.

Метод заключается в гетеро циклизации вторичных ароматических аминов из формальдегидом и метилетилкетоном в присутствии хлорной кислоты пропорционально схеме: R2 R2 Ch3 HCHO Ch3ch2-coch3 NH Hclo4 N CLO R1 R1

Синтезированные соли владеют реакционно способной метательной группой, которая находится в положении 4 хилинового ядра. Да, быть взаимодействии указанных солей из парадиметиламинобензальдегиддом образуются 4- (n – диметиламиностирил) замещены соли хинолинию (И-Х): N – Арилзамищени четвертинные соли 3 –метиллипидинию реагируют также с кетоном Миллера, образовывая красители (ХИ-ХИИИ), которые дозволительно роглядати как -диметиламинофенил замещены красители стиролив (УП-ИХ).

Сн3 R3 Ch3 Ch=c-c6h4n(Ch3) 2p R2 R3 R2 CLO O=c-c6h4n(Ch3) 2 CLO N Ac2o N R1 R1 (И-Х) R3=h;(Xи-хиии) R3= C6h4n(Ch3) 2 Все синтезированы соединения – темные порошки, практически нерастворимые в воде и хорошо растворимые в органических полярных растворителях. Физичко-химични свойства и вина анализов представленные в табл. 1.

Противомикробную активность полученных солей изучали общепроникнутым методом серийных разведений исследуемого препарата в м’ясо-пептонному бульоне. В качестве тестовых микробов использовали staphiloccocus aureus (золотистый стафилококк шомм 209) Escherichia colи (кишечна палочка), Pseudomas aeruqinosa (синегнойна палочка), Candida albicvans (дрижджеподибни грибы рода Кандида), Bacillus subtilis (сенная палочка).

Установлена некоторая кабала между противомикробной активностью и структурой химических соединений. Да, пропорционально отношению к Е. colи, Ps. aeruqinosa и С. Albicvans активнее оказались микроорганизмов. Введение группы ЭВОН у 6 положения хиномлиноевого ядра (соединение Ш) кое-что снижает активность напротив стафилококка, все повышает активность препарата пропорционально отношению к другим микроорагнимив. Замена N – алкильной группы для бензольну (спол. 1у) повышает активность препарата напротив всех исследуемых микробов. Введение у 6 положения группы Сн3 (спол. В) вызывает умаление активности напротив Pseudomas aeruqinosa, Е. Colи и повышает активность напротив staphiloccocus aureus и Candida albicvans. Введение группы Осн3 в правило : (спол.УІ) повышает активность напротив staphiloccocus aureus и Candida albicvans снижает напротив других микробов. Замена N – алкильной группы для N – фенильну (спол. УП) повышает осложнение молекулы (спол. УШ, ІХ, Х) не приводит к повышению активности, а в некоторых случаях сопровождается ее понижением.

Противомикробная активность солей липидинию

Соли липидинию, их 3-метил и 3-ацетил - замещенные необязательно вступают в реакцию конденсации с йодидом 1-етилхинолинию в присутствии основных катализаторов, образовывая несимметричные монометин – хиноцианинови красители (И-ХИ), физикохимични свойства которых представлены в табл. 1.

R2 X R N Ch===== N – C2h5 R3 (И-ХИ)

Н11с5 – N Ch===== N – C5h6 (ХІІ) R3:н(а); Сн3(б); Сосн3(в)

Маккинстри доказал, сколько настоящий непринужденный избранник этого класса красителей, хинолиновий синий (ХІІ) показал высокую активность in vitro напротив возбудителей дифтерии, и грам-позитивних коккових бактерий. Были исследованы и другие биологические свойства этих соединений. Поэтому интересовало анализировать не изученные в этом отношении представители класса.

С целью изучения антимикробной активности были синтезированы три серии монометинових красителей с разным значением R3: разряд “а” - R3 = Н, разряд “б” - R3 = Сн3, разряд “в” - R3 = Сосн3.

Все синтезированные соединения являют собой темные порошки, хорошо растворимые в полярных. Нерастворимые в неполярных органических растворителях и необязательно растворимые в воде. Активнейшими оказались соединения серии “б”, которые содержат N – бензольни заместители R1 = C6h5ch2 (Иуб, Уб, У1б), причем их активность увеличивается в ряду быть таких значением R2: 6-осн3

Найчутливишисм к монометинциановим красителем (И-ХИ) оказался Рs. Aerog. Менее чувствительным – Cand. all. и Bac.antr. Наименее чувствительными является E.coli Staph. аureus.

Экспериментальная часть

Определение биологической активности 1 – бензил – 3 метил – 4 [n – диметиламиностирил] – 6 метоксихинолиний перхлорату и 1-етил – 3- метила – 4 – [n – диметиламиностирил] хинолиний перхлорату.

Оборудование и реактивы

Автоклав электрический (ГОСТ 9586-75)

Вес лабораторная ривноплеча.

Дистиллятор.

Лупа (ГОСТ 25706-83)

Микроскоп (ГОСТ 8284-78)

ОН-МЕТР.

Термостат электрический для выращивания бактерий с автоматическим терморегулятором к 50ос и с термометром с ценой подилки 0,2ос.

Шкаф сушильный лабораторный.

Бумага фильтровальная (ГОСТ 12026-76)

Посуда мерна лабораторный стеклянный (ГОСТ 1770-74, ГОСТ 20292-74).

Пипетки вмистимистю 1-10 см3.

Стаканы лабораторные (ГОСТ 25336-82).

Чашки бактериологические.

Вода дистиллирована (ГОСТ 6709-72).

Среда Ендо сухое питательна. Спирт этиловый ректификован (ГОСТ 5962-67).

Стирол N8 и N51.

Подготовка к анализу.

1.2.1. Подготовка посуды и материалов.

Всю бактериологическую посуду заранее стерилизацией хорошо моют и высушивают.

Чашки Петри составляют и заворачивают в бумагу. Между крышкой и дном бактериологических чашек, которые используются для розливки среды Ендо, кладут кружки фильтровального бумаге диаметром для 1-2 см больше диаметра чашки.

Пипетки составляют пропорционально 6-10 штук и заворачивают в папе.

1.2.2. Стерилизация посуды.

Подготовленную посуду стерилизуют сухим жаром в сушильном шкафу быть температуре 1605ос в путь 1 час., считая путем момента достижения этой температуры. Простерилизований посуду вынимают из сушальной шкафа после его охлаждения ниже 60ос. Посуда дозволительно простерилизувати в автоклаве быть 1262ос (1,% кг с/см2) 30 хв.

1.2.3. Приготовление сред и реактивов.

1.2.3.1. Приготовление раствора стирола в таких концентрациях 0,1%, 0,01%, 0,0001%.

Отвешивают для весе лабораторной ривноплечий 0,1 граммов; 0,01 граммов, 0,0001 граммов стрилу N8 и растворяют в сообразно кадры в 100 см3 дистиллированной воды быть температуре 70-80ос.

Отвешивают для весе лабораторной ривноплечий 0,1 граммов; 0,01 граммов и 0,001 граммов стирола N51 и растворяют сообразно кадры в 100 см3 дистиллированной воды быть температуре 70-80ос.

К каждому из растворов добавляют пропорционально 4г бездушный среды Ендо размешивают, кипятят к полному расплавлению агара 2-3 хв. Профильтровывают и вдругорядь доводят заблаговременно кипения. Охлаждают к температуре 45-50ос, разливают в стерильные чашки Петри слоем 3-4 мм

После застивання подсушивают быть температуре 371ос в путь 40-60 хв.

Проведение анализа

Подготовлены чашки Петри со средой Ендо и Стиролу разных концентраций 0,1; 0,01; 0,001 граммов разделяют для два сектора.

Берут одинаковый посевной суть Shigella I Salmonella петлей штрихами для вид среды. Перед каждым посевом петлю довольно обеззараживать для пламени водка. Занял делают для шестерых чашках, в каждой пропорционально два вида бактерий.

Чашки помещают, крышками вниз, в термостат для 24 час. для инкубирования быть температуре 37ос.

После инкубирования определяют противомикробную активность стирола N8 и N51, в концентрациях 0,1%, 0,01%, 0,0001% не подавляет барыш Shigella. Рост Salmonella не наблюдался для чашках Петри, где был стирол N8 и N51 с концентрацией содержанию 0,1%, а быть концентрациях 0,01%, 0,0001% барыш Salmonella не подавлялся.